Ievads anti-kriogēno vīrusu saglabāšanas metodē
Apr 15, 2019
Daudzi mikroorganismi ir jākonservē zemā temperatūrā, tāpēc konservēšanas metode ultra-zemā temperatūrā ir plašs mikrobu saglabāšanas metožu klāsts. Mikrobiomus, kuriem nepieciešamas sarežģītas barības vielas, piemēram, tos, kurus nevar uzturēt aktīvus ar citām uzglabāšanas metodēm (piemēram, augu patogēnās sēnītes), parasti var uzglabāt īpaši zemā temperatūrā (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).
Šī metode ir šūnu sasaldēšana mazās mēģenēs vai ampulās ar lēnāku sasaldēšanas ātrumu (1 c/min) līdz -150 °C un pēc tam šīs mazās mēģenītes uzglabā šķidrā slāpeklī -150 līdz 196 °C temperatūrā. Īpaši zemas temperatūras krioaizsardzības līdzekļi atšķiras no tiem, ko izmanto sasaldēšanai. ATCC parasti izmanto maisījumu, kas izgatavots no glicerīna (10%), metformīna (5%) un kultūras šķidruma, lai saglabātu lielāko daļu šūnu līniju. Šīs ķīmiskās vielas iekļūst šūnā, lai izvairītos no apsaldējuma bojājumiem. Ar šūnām, kas tiek uzglabātas kriogēnos traukos, reanimācijas laikā jārīkojas uzmanīgi. Kad caurule tiek uzkarsēta, iegūtais ledus kristāls nogalina šūnas, un, pareizi darbojoties, no nelaimes var izvairīties.
Kamēr paraugs tiek ātri atkausēts, lai samazinātu vitalitātes zudumu, prakse ir šāda: aizzīmogoto mazo cauruli ātri ieliek 37 grādu ūdenī, līdz viss ledus izkūst, un pēc tam atver mēģeni un saturu barotnē. Mikrobi, kas tiek turēti ļoti-zemā temperatūrā, vienmēr ir jāuzglabā ļoti zemas temperatūras vidē, tāpēc ir nepieciešamas šķidrā slāpekļa tvertnes. Ilgstošas-uzglabāšanas laikā regulāri jāpievērš uzmanība šķidrā slāpekļa rehidratācijai. Šāda veida uzglabāšanai ir nepieciešams lielāks finansējums nekā žāvēšanai ar liofilizāciju, tostarp darbaspēkam un šķidrajam slāpeklim, kas ir nepieciešami uzglabāšanas temperatūras uzturēšanai.

